מיקרוסקופ פלואורסצנטי משתמש בשיטות ובאמצעי זהירות
שיטת שימוש:
(1) הנח את יריעת החומר על במת המוביל.
(2) הפעל את ווסת המתח של מיקרוסקופ הקרינה. לאחר מכן לחץ על קבוצת ההתחלה כדי להדליק את מנורת ה-UV לא תכבה במשך 15 דקות, ולא תופעל מחדש במשך 3 דקות לאחר כיבויה.
(3) סובב את מסנן העירור ל-v, סרט דיכרואי ל-v, בחר מסנן חוסם 495 או 475nm.
(4) בחר uvFL40, uvFL100 מיקרוסקופ עדשת אובייקטיבית מקבלת פלואורסצנטי.
(5) הוסף שמן לא פלואורסצנטי על השקופית, תחילה 40 x, ולאחר מכן 100 x מיקוד מיקרוסקופיה. הראה פלואורסצנטיות.
(7) מכיוון שהחומר הפלורסצנטי על ידי קרינה אולטרה סגולה עם צמיחת הקרינה נחלש בהדרגה עם הזמן, אז הבדיקה המיקרוסקופית צריכה להיות לעתים קרובות לשנות את שדה הראייה.
(8) יכול גם להשתמש בחומר מיקרוסקופי של uvFL10 או uvFL20 בהגדלה נמוכה (עם הגדלה נמוכה ללא הוספת שמן לא פלואורסצנטי).
שיטת הקלטת תמונת פלואורסצנטי:
תמונת פלואורסצנטי הנראית במיקרוסקופ פלואורסצנטי, האחת בעלת מאפיינים מורפולוגיים, השנייה היא עם הצבע והבהירות של הקרינה, בשיפוט התוצאות יש לשלב את השניים בשיקול דעת מקיף. התוצאות נרשמות על פי אינדיקטורים סובייקטיביים, כלומר על ידי התבוננות ויזואלית של העובד. כתצפית איכותית כללית, אמינה בעצם. עם התפתחות הטכנולוגיה והמדע, בדרגות שונות, השימוש באינדיקטורים אובייקטיביים כדי לתעד את תוצאות השיפוט, כגון שימוש בספקטרופוטומטר תאים, מנתח תמונה ומכשירים אחרים. עם זאת, יש לשלב את התוצאות שנרשמו על ידי מכשירים אלה גם עם שיפוט סובייקטיבי.
טכנולוגיית צילום מיקרוסקופ פלואורסצנטי נחוצה מאוד להקלטת תמונות פלואורסצנטי, מכיוון שקל לדהות ולהחליש את הקרינה, כדי להקליט באופן מיידי את תוצאות הצילום. השיטה זהה בעצם למיקרוגרפיה רגילה. רק צריך להשתמש בסרט צילום במהירות גבוהה כגון ASA200 למעלה או 24. למעלה. מכיוון שהאור האולטרה סגול על אפקט פרץ הקרינה, כגון סמני FITC, בהקרנת האור האולטרה סגול 30s, בהירות הקרינה ירדה ב-50%. לכן, מהירות החשיפה איטית מכדי ללכוד את תמונת הקרינה. למיקרוסקופ פלואורסצנטי מחקר כללי יש התקני מערכת מיקרו-צילום אוטומטית למחצה או אוטומטית.
אמצעי זהירות:
(1) פעל בהתאם לדרישות של מדריך המפעל של מיקרוסקופ פלואורסצנטי, אל תשנה את ההליך באופן שרירותי.
(2) הבדיקה צריכה להתבצע בחדר החושך. לאחר הכניסה לחדר החושך, חבר את אספקת החשמל, הדלק את מנורת הכספית בלחץ גבוה במיוחד למשך 5-15דקות, המתן עד שמקור האור פולט אור חזק להתייצב, והעיניים מותאמות לחלוטין לחדר החושך, וכן ואז להתחיל להתבונן בדגימה.
(3) כדי למנוע נזק לעיניים מאור אולטרה סגול, יש להרכיב משקפי מגן בעת התאמת מקור האור.
(4) לבדוק את הזמן בכל פעם עד 1 ~ 2h מתאים, יותר מ 90 דקות, עוצמת האור של מנורת כספית בלחץ גבוה במיוחד ירדה בהדרגה, הקרינה נחלשה; דגימות מוקרנות באור אולטרה סגול 3 ~ 5 דקות, הקרינה גם נחלשת באופן משמעותי; לכן, * לא יהיה יותר מ-2 ~ 3 שעות.
(5) חיי מקור האור של מיקרוסקופ פלואורסצנטי מוגבלים, הדגימה צריכה להיות בדיקה מרכזית, על מנת לחסוך זמן ולהגן על מקור האור. כאשר הוא חם, יש להוסיף קירור מאוורר, יש לרשום נורה חדשה מתחילת השימוש בזמן. כאשר המנורה כבויה ורוצה להשתמש בה שוב, יש לקרר את הנורה מספיק לפני ההדלקה. יש להימנע ממקור האור מספר פעמים.
(6) התבונן בדגימה מיד לאחר הצביעה, שכן הקרינה תפחת בהדרגה עם הזמן. אם הדגימה מונחת בשקית ניילון מפוליאתילן המאוחסנת ב-4 מעלות, היא יכולה לעכב את זמן היחלשות הקרינה ולמנוע את אידוי חומר האיטום.
(7) קריטריונים לשיפוט עבור בהירות הקרינה: מחולקים בדרך כלל לארבע רמות, כלומר, 'אחת' - אין או נראית פלואורסצנטי חלש. '+' - רק פלואורסצנטי ברור גלוי. '+ +' - גלוי עם בהיר
