הבדלים בין מיקרוסקופיית הקרינה למיקרוסקופיה קונפוקלית
מיקרוסקופ פלואורסצנטי
1. מיקרוסקופ פלואורסצנטי משתמש באור אולטרה סגול כמקור אור כדי להקרן את האובייקט שנבדק, וגורם לו לפלוט פלואורסצנציה, ואז להתבונן בצורת ומיקומו של האובייקט תחת המיקרוסקופ. מיקרוסקופיית הקרינה משמשת לחקר הקליטה, ההובלה, ההפצה והלוקליזציה של חומרים בתוך תאים. חומרים מסוימים בתאים, כמו כלורופיל, יכולים פלואורסציה כאשר הם נחשפים לקרינה אולטרה סגולה; ישנם גם כמה חומרים שאינם יכולים לפלוט את הקרינה בעצמם, אך יכולים גם לפלוט פלואורסצנציה אם הוכתמו בצבעים פלואורסצנטיים או נוגדנים פלורסנטיים ומוקרנים באור אולטרה סגול. מיקרוסקופיית פלואורסצנציה היא אחד הכלים למחקר איכותי וכמותי על חומרים כאלה.
2. עקרון מיקרוסקופ הקרינה:
(א) מקור אור: מקור האור פולט אור באורכי גל שונים (מאולטרה סגול לאינפרא אדום).
(ב) מסנן עירור מקור אור: העברת אור באורך גל ספציפי שיכול לגרום לקרינה בדגימה, תוך חסימת אור חסר תועלת לקרינה מרגשת.
(ג) דגימות פלורסנטיות: בדרך כלל מוכתמות בפיגמנטים פלואורסצנטיים.
(ד) חסימת מסנן: הוא מעביר באופן סלקטיבי פלואורסצנציה על ידי חסימת אור עירור שאינו נספג על ידי הדגימה, וכמה אורכי גל בפלואורסצנציה מועברים באופן סלקטיבי. מיקרוסקופ המשתמש באור אולטרה סגול כמקור אור כדי לגרום לאובייקט המואר לפטור פלואורסצנט. מיקרוסקופ האלקטרונים הורכב לראשונה על ידי קנור והרוסקה בברלין, גרמניה בשנת 1931. מיקרוסקופ זה משתמש בקורות אלקטרונים במהירות גבוהה במקום קורות אור. בשל אורך הגל הקצר בהרבה של זרימת האלקטרונים בהשוואה לגלי אור, ההגדלה של מיקרוסקופ אלקטרונים יכולה להגיע ל 8 0 0000 פעמים, עם גבול רזולוציה מינימלי של 0.2 ננומטר. מיקרוסקופ האלקטרונים הסורק, ששימש לראשונה בשנת 1963, מאפשר לאנשים לראות את המבנים הזעירים על פני האובייקטים.
3. היקף היישום: משמש להגדלת תמונות של חפצים קטנים. משמש בדרך כלל לתצפיות על ביולוגיה, רפואה, חלקיקים מיקרוסקופיים וכו '.
מיקרוסקופ קונפוקלי
1. מיקרוסקופ קונפוקלי מוסיף עדשת חצי רפלקטיבית למחצה לנתיב האור המשתקף, שמסיט את האור המשתקף שעבר דרך העדשה בכיוונים אחרים. בנקודת המוקד שלו, יש בבל עם חור חור הממוקם בנקודת המוקד, ומאחורי הבבל נמצא צינור פוטו -מרומבי. ניתן לדמיין כי האור המשתקף לפני ואחרי המיקוד של אור הגילוי לא יכול להיות ממוקד בחור הקטן דרך מערכת קונפוקלית זו ויחסום על ידי הבלבל. אז הפוטומטר מודד את עוצמת האור המשתקפת בנקודת המוקד.
2. עקרון: מיקרוסקופים אופטיים מסורתיים משתמשים במקורות תאורה בשדה, ותמונתו של כל נקודה על הדגימה מושפעת על ידי דיפרקציה או אור מפוזר מנקודות שכנות; מיקרוסקופ קונפוקלי של סריקת לייזר משתמשת בקרן לייזר כדי להאיר חור חור ויצירת מקור אור נקודה כדי לסרוק כל נקודה במישור המוקד של הדגימה. הנקודה המוארת בדגימה מצולמת בחור הגילוי, והיא מתקבלת נקודה אחר נקודה או קו על ידי צינור פוטו -מולטיפיל (PMT) או מכשיר צימוד קר (CCCD) לאחר גילוי חור הסיכה, ויצר במהירות תמונה פלואורסצנטית על מסך צג המחשב. חור הארה וחור הגילוי מצומדים ביחס למישור המוקד של העדשה האובייקטיבית. הנקודות במישור המוקד ממוקדות בו זמנית בחור האיר ובמוצא הפליטה, ונקודות מחוץ למישור המוקד לא יוטבעו בחור הגילוי. הדימוי הקונפוקלי המתקבל הוא חתך הרוחב האופטי של הדגימה, ומתגבר על החיסרון של תמונות מטושטשות במיקרוסקופים כלליים.
