עקרון העבודה של מיקרוסקופ לייזר קונפוקאלי
מיקרוסקופיה קונפוקלית בלייזר מבוססת על הדמיית מיקרוסקופ פלואורסצנטי בתוספת מכשיר סריקת לייזר, שימוש בעיבוד תמונה ממוחשב, הרזולוציה של הדמיה אופטית גדלה ב-30% - 40%, שימוש בעירור אור אולטרה סגול או גלוי של פלורסנט בדיקות, כדי לקבל את תמונת הקרינה של המיקרו-מבנה הפנימי של תאים או רקמות, ברמה התת-תאית כדי לצפות באותות פיזיולוגיים ושינויים במורפולוגיה התאית, כגון Ca2+, PH, פוטנציאל ממברנה וכו', הפכו דור חדש של כלי מחקר רבי עוצמה במורפולוגיה, ביולוגיה מולקולרית, מדעי המוח, פרמקולוגיה, גנטיקה ותחומים נוספים. מערכת ההדמיה הקונפוקלית בלייזר היא דור חדש ועוצמתי של כלי מחקר בתחומי המורפולוגיה, ביולוגיה מולקולרית, מדעי המוח, פרמקולוגיה, גנטיקה וכן הלאה. מערכת ההדמיה הקונפוקלית בלייזר יכולה לשמש כדי לצפות במגוון של רקמות ותאים מוכתמים, לא מוכתמים ומתויגים פלואורסצנטי, וכו', כדי לצפות וללמוד את הצמיחה וההתפתחות של קטעי רקמה ותאים in vivo, ולחקור ולמדוד תוך תאיים הובלה של חומרים והמרת אנרגיה. הוא מסוגל לבצע מחקר של שינויים יונים ו-PH בתאים חיים (RATIO), מחקר מוליכים עצביים, הפרעות דיפרנציאליות וטומוגרפיה פלואורסצנטית, טומוגרפיה וחפיפה פלואורסצנטית מרובה, ניתוח ספקטרוסקופיה של פלואורסצנציה של מדדי הקרינה של ניתוח כמותי של דגימות הקרינה של זמן- סריקה מושהית ורכיבים דינמיים של מבנה דינמי תלת מימדי של רקמות ותאים, ניתוח של העברת אנרגיית תהודה פלואורסצנטית, מחקר הכלאה של פלואורסנציה במקום (FISH), מחקר ציטושלד (FISH), וחקר ציטושלד. FISH), מחקר שלד ציטונים, מחקר לוקליזציה של גנים, ניתוח מוצר PCR בזמן אמת במקום, מחקר התאוששות מלבנת פלואורסצנציה (FRAP), מחקר תקשורת בין-תאית, מחקר בין-חלבונים, מחקר על פוטנציאל ממברנה ונזילות ממברנה וכו', להשלמת ניתוח ניתוח תמונה ושחזור תלת מימדי וניתוחים אחרים.
אזורי יישום של מערכת מיקרוסקופ לייזר קונפוקאלי:
כולל רפואה, מחקר מדעי של בעלי חיים וצמחים, ביוכימיה, **ולוגיה, ביולוגיה של התא, עוברי רקמה, מדעי המזון, גנטיקה, פרמקולוגיה, פיזיולוגיה, אופטיקה, פתולוגיה, בוטניקה, מדעי המוח, ביולוגיה ימית, מדעי החומרים, מדע אלקטרוני, מכניקה, נפט גיאולוגיה, מינרלוגיה.
עקרונות בסיסיים
המיקרוסקופ האופטי המסורתי משתמש במקור אור שדה, התמונה של כל נקודה על הדגימה תהיה מופרעת על ידי עקיפה או פיזור האור מהנקודות השכנות; המיקרוסקופ הקונפוקאלי של הלייזר משתמש בקרן לייזר דרך החור המאיר כדי ליצור מקור אור נקודתי כדי לסרוק כל נקודה במישור המוקד של הדגימה, הנקודה המוקרנת על הדגימה תצולם בחריר הזיהוי, ולאחר מכן תתקבל על ידי זיהוי חריר לאחר צינור הכפלת הנקודות (PMT) או התקן הצמוד האלקטרו-קר (cCCD), נקודה אחר נקודה או שורה אחר שורה, ולאחר מכן להיות מוצג במהירות על צג המחשב. מתקבלת נקודה אחר נקודה או שורה אחר שורה על ידי ה-PMT או cCCD מאחורי חריר הבדיקה, התמונה הפלורסנטית נוצרת במהירות על מסך צג המחשב. חריר ההארה וחור הזיהוי מצומדים ביחס למישור המוקד של עדשת המטרה, הנקודות במישור המוקד ממוקדות בחריר ההארה ובחור הפליטה בו זמנית, והנקודות מחוץ למישור המוקד לא להצטלם בחריר הזיהוי, כך שהתמונה הקונפוקלית המתקבלת היא חתך אופטי של הדגימה, שמתגבר על החיסרון של טשטוש התמונה של המיקרוסקופ הרגיל.
