מה הצורך במיקרוסקופ קונפוקאלי?
1. מיקרוסקופים אופטיים הגיעו למצב של שלמות באמצעות המאמצים והשיפורים של קודמינו הגדולים. למעשה, מיקרוסקופים רגילים יכולים לספק לנו תמונות מיקרוסקופיות יפות בפשטות ובמהירות. עם זאת, התרחש אירוע שהביא חדשנות מהפכנית לעולם הכמעט מושלם זה של מיקרוסקופיה. זו הייתה המצאת "המיקרוסקופ הקונפוקאלי סריקת הלייזר". המאפיין של סוג חדש זה של מיקרוסקופ הוא שהוא משתמש במערכת אופטית השואבת מידע תמונה רק על פני השטח שבו הפוקוס ממוקד, ומשחזרת את המידע המתקבל בזיכרון התמונה תוך כדי שינוי הפוקוס, ובכך משיגה מידע תלת מימדי מלא. תמונה חיה של אינטליגנציה. באמצעות שיטה זו ניתן להשיג בקלות מידע על צורת פני השטח שלא ניתן לאשר במיקרוסקופ רגיל. בנוסף, עבור מיקרוסקופים אופטיים רגילים, "הגברת הרזולוציה" ו"העמקת עומק המיקוד" הם תנאים סותרים, במיוחד בהגדלות גבוהות. עם זאת, במיקרוסקופיה קונפוקלית, בעיה זו נפתרת בקלות.
2. יתרונות של מערכת אופטית קונפוקלית
המערכת האופטית הקונפוקלית מבצעת הארה נקודתית על המדגם, והאור המוחזר משתמש גם בקולטן נקודתי כדי לקבל את האור. כאשר הדגימה ממוקמת במיקום הפוקוס, כמעט כל האור המוחזר יכול להגיע לפוטו-רצפטור. כאשר המדגם אינו ממוקד, האור המוחזר אינו יכול להגיע אל הפוטורצפטור. במילים אחרות, במערכת האופטית הקונפוקלית, רק התמונה החופפת לפוקוס תופק, וכתמי האור והאור המפוזר חסר התועלת יהיו מוגנים.
3. למה להשתמש בלייזר?
במערכת האופטית הקונפוקלית, המדגם מואר בנקודה, והאור המוחזר נקלט גם באמצעות קולטן נקודתי. לכן, מקורות אור נקודתיים הופכים נחוצים. לייזרים הם מקורות אור נקודתיים מאוד. ברוב המקרים, מקור האור של מיקרוסקופים קונפוקאליים משתמש במקורות אור לייזר. בנוסף, המאפיינים של לייזר כמו מונוכרומטיות, כיווניות וצורת קרן מצוינת הם גם סיבות חשובות לאימוצו הנרחב.
