מה ההבדל בין מיקרוסקופ פלואורסצנטי למיקרוסקופ הפוך?
המיקרוסקופ הוא מכשיר חשוב בתרבית תאים ובניסויים נגזרות קשורים. כיום ישנם סוגים שונים של מיקרוסקופים בשוק. זה אתגר לבחור מיקרוסקופ שעונה על הצרכים שלך ומתאים. להלן מציגים את העקרונות של מיקרוסקופים הפוכים ומיקרוסקופים פלואורסצנטיים, כך שתוכל לבחור בקלות.
הרכבו של מיקרוסקופ הפוך זהה לזה של מיקרוסקופ רגיל, והוא כולל בעיקר שלושה חלקים: חלק מכני, חלק הארה וחלק אופטי.
הרכבו של מיקרוסקופ הפוך זהה לזה של מיקרוסקופ זקוף רגיל, אלא שעדשת האובייקטיב ומערכת ההארה הפוכים, הראשון נמצא מתחת לבמה והשני מעל הבמה.
מבנה זה מאפשר להרחיב משמעותית את המרחק האפקטיבי בין מערכת ריכוז ההארה לבמה, מה שנוח להצבת חפצים עבים יותר שניתן לצפות בהם כמו צלחות פטרי וצלוחיות תרבית תאים (כמובן שגם שקופיות זכוכית מקובלות). מרחק העבודה ביניהם לא חייב להיות גדול במיוחד.
המיקרוסקופ ההפוך משמש לתצפית במיקרואורגניזמים, תאים, חיידקים, תרבית רקמות, תרחיפים, משקעים וכו' ביחידות רפואה ובריאות, מכללות ואוניברסיטאות ומכוני מחקר. הוא יכול לצפות ברציפות בתהליך של רבייה וחלוקה של תאים וחיידקים במצע התרבות, ויכול לצלם כל צורה של תהליך זה.
הוא נמצא בשימוש נרחב בציטולוגיה, טפילולוגיה, אונקולוגיה, אימונולוגיה, הנדסה גנטית, מיקרוביולוגיה תעשייתית, בוטניקה ותחומים אחרים.
מיקרוסקופ פלואורסצנטי משמש לחקר הספיגה, ההובלה, ההפצה והלוקליזציה של חומרים כימיים בתאים.
עבור האובייקט שייבדק, ישנן שתי דרכים ליצור פלואורסצנטי: אוטופלואורסצנטי, אשר פולט פלואורסצנטי ישירות לאחר קרינה אולטרה סגולה; קרינה משנית, שיכולה לפלוט פלואורסצנטיות לאחר שהאובייקט הנצפה מטופל בצבעי פלואורסצנטי ולאחר מכן מוקרנים באור אולטרה סגול.
חומרים מסוימים בתאים, כמו כלורופיל, מייצרים אוטופלואורסצנטי לאחר שהוקרנו על ידי קרניים אולטרה סגולות; חלק מהחומרים אינם יכולים להקרין בעצמם, אך אם הם מוכתמים בצבעים ניאון או בנוגדנים פלואורסצנטיים, הם יכולים גם לפלוט פלואורסצנטיות משנית לאחר שהוקרנו על ידי קרניים אולטרה סגולות.
מיקרוסקופ הקרינה משתמש במקור אור נקודתי בעל יעילות אור גבוהה, ופולט אור באורך גל מסוים (אור אולטרה סגול 365nm או אור כחול סגול 420nm) דרך מערכת מסנן הצבע כאור העירור, לאחר ריגוש החומרים הפלורסנטים בדגימה לפלוט. צבעים שונים של הקרינה, ולאחר מכן התבוננו על ידי הגדלה של המטרה והעיניות.
תחת רקע הניגודיות החזק, גם אם הקרינה חלשה מאוד, היא קלה לזיהוי ובעלת רגישות גבוהה. הוא משמש בעיקר לחקר מבנה התא ותפקודו והרכבו הכימי.
