העיקרון והמאפיינים המבניים של מיקרוסקופ פלואורסצנטי
מיקרוסקופיה פלואורסצנטית משתמשת בנקודה בעלת יעילות אור גבוהה כדי לפלוט אורך גל מסוים של אור (כגון אור אולטרה סגול 3650 אינץ' או אור כחול סגול 4200 אינץ') דרך מערכת סינון צבע כאור עירור, ומעוררת את החומרים הפלורסנטים בדגימה כדי לפלוט שונים צבעי הקרינה. לאחר מכן, הוא נצפה באמצעות הגדלה של עדשת המטרה והעינית. בצורה זו קל לזהות גם כאשר הקרינה חלשה מאוד על רקע חזק, בעל רגישות גבוהה. הוא משמש בעיקר לחקר מבנה ותפקוד התא, כמו גם הרכב כימי. המבנה הבסיסי של מיקרוסקופ פלואורסצנטי מורכב ממיקרוסקופ אופטי רגיל בתוספת אביזרים כגון מקור אור ניאון, מסנן עירור, מפריד אלומות דיכרואיות ומסנן חוסם. מקורות אור פלורסנט משתמשים בדרך כלל במנורות כספית בלחץ גבוה במיוחד (50-200W), שיכולות לפלוט אור באורכי גל שונים. עם זאת, לכל חומר ניאון יש אורך גל של אור עירור המייצר את הקרינה החזקה ביותר, ולכן יש להוסיף מסנני עירור (בדרך כלל מסנני עירור אולטרה סגול, סגול, כחול וירוק) כדי לאפשר רק לאורך גל מסוים של אור עירור לחדור ולהקרין את דגימה, תוך כדי קליטת כל שאר האור. לאחר הקרנה באור עירור, כל חומר פולט פלואורסצנטיות נראות לאורך זמן ארוך יותר מאורך הגל של הקרינה תוך זמן קצר מאוד. לפלוורסצנטיות יש סגוליות והיא בדרך כלל חלשה יותר מאור עירור. על מנת לצפות בקרינה ספציפית, יש צורך להוסיף חסימה (או דיכוי) מאחורי עדשת המטרה ולהשתמש בה בשילוב.
ההבדל בין מיקרוסקופ פלואורסצנטי למיקרוסקופ רגיל
1. שיטת התאורה היא בדרך כלל מסוג קרן נופלת, שבה מקור האור מוקרן על המדגם דרך עדשת אובייקטיבית;
2. מקור האור הוא אור אולטרה סגול, עם אורך גל קצר יותר ורזולוציה גבוהה יותר מאשר מיקרוסקופים רגילים;
3. ישנם שני פילטרים מיוחדים, זה שלפני מקור האור משמש לסינון אור נראה, וזה שבין העינית לעדשת האובייקטיבית משמש לסינון קרניים אולטרה סגולות כדי להגן על העין האנושית.
מיקרוסקופיה פלואורסצנטית היא גם סוג של מיקרוסקופיה אופטית, כשההבדל העיקרי הוא אורכי גל עירור שונים. זה קובע את ההבדלים במבנה ובשימוש בין מיקרוסקופיה פלואורסצנטית למיקרוסקופיה אופטית רגילה.
מיקרוסקופ פלואורסצנטי הוא כלי בסיסי לציטוכימיה של אימונופלואורסצנטי. הוא מורכב ממרכיבים עיקריים כגון מקור אור, מערכת לוחות סינון ומערכת אופטית. הוא משתמש באורך גל מסוים של אור כדי לעורר את המדגם כדי לפלוט פלואורסצנטי, ומגדיל אותו דרך עדשות אובייקטיביות ומערכת עינית כדי לצפות בתמונת הקרינה של הדגימה.
