דרישות לייצור דגימות מיקרוסקופ פלואורסצנטי
（1） שקף זכוכית
עובי השקף צריך להיות בין 0.8 ל-1.2 מ"מ. אם השקף עבה מדי, מצד אחד, הוא סופג יותר אור, ומצד שני, הוא לא יכול לגרום לאור עירור להתאסף על הדגימה. השקף חייב להיות חלק, אחיד בעובי וללא הקרינה ספונטנית ברורה. לפעמים יש צורך בשקופיות זכוכית קוורץ.
（2） כיסוי זכוכית
עובי זכוכית הכיסוי הוא בערך 0.17 מ"מ, שהיא חלקה ונקייה. על מנת לשפר את העירור, ניתן להשתמש גם בזכוכית כיסוי הפרעות. זוהי זכוכית כיסוי שתוכננה במיוחד עם מספר שכבות של חומרים (כגון מגנזיום פלואוריד) בעלות השפעות הפרעות שונות על אורכי גל שונים של אור. זה יכול לאפשר לפריחה לעבור בצורה חלקה, בעוד שעירור השתקפות יכול לעורר את הדגימה.
（3） דגימה
פרוסות רקמה או דגימות אחרות לא צריכות להיות עבות מדי, מכיוון שאור העירור נצרך בעיקר בחלק התחתון של הדגימה, בעוד שהחלק העליון הנצפה ישירות על ידי עדשת המטרה אינו נרגש במלואו. בנוסף, חפיפת תאים או מיסוך טומאה יכולים להשפיע על כושר השיפוט.
（4） חומר איטום
גליצרין משמש בדרך כלל כחומר הרכבה, והוא חייב להיות נקי מקרינה ספונטנית, חסר צבע ושקוף. הבהירות של הקרינה בהירה יותר ב-pH 8.5 ~ 9.5, ולא קל לדעוך במהירות. לכן, תערובת שווה של גליצרול ו-0.5mol/l carbonate buffer ב-pH 9.0-9.5 משמשת בדרך כלל כחומר איטום.
（5） שמן מראה
בעת התבוננות בדגימות באמצעות מיקרוסקופ פלואורסצנטי שדה כהה ומיקרוסקופ שמן, יש צורך להשתמש בשמן עדשות. עדיף להשתמש בשמן לא פלואורסצנטי שנעשה במיוחד, אותו ניתן גם להחליף בגליצרול כפי שהוזכר לעיל. ניתן להשתמש גם בפרפין נוזלי, אך מקדם השבירה נמוך ויש לו השפעה קלה על איכות התמונה.
אמצעי זהירות לשימוש במיקרוסקופ פלואורסצנטי
(1) עקבו בקפדנות אחר דרישות הוראות היצרן של מיקרוסקופ הקרינה ואל תשנה את התוכנית באופן שרירותי.
(2) הבדיקה צריכה להתבצע בחדר חשוך. לאחר הכניסה לחדר החושך, חבר את אספקת החשמל והדלק את מנורת הכספית בלחץ גבוה במיוחד למשך 5 עד 15 דקות. לאחר שמקור האור פולט אור חזק ומתייצב, העיניים מסתגלות באופן מלא לחדר החושך לפני שמתחילים לצפות בדגימה.
(3) כדי למנוע נזק UV לעיניים, יש להרכיב משקפי מגן בעת התאמת מקור האור.
(4) זמן הבדיקה צריך להיות 1-2 שעות בכל פעם. אם זה עולה על 90 דקות, עוצמת האור של מנורת הכספית בלחץ גבוה יורדת בהדרגה והפלורסנטיות נחלשת; לאחר שנחשף לקרינה אולטרה סגולה במשך 3-5 דקות, גם הקרינה של הדגימה ירדה באופן משמעותי; לכן, זה לא יעלה על 2-3 שעות לכל היותר.
(5) תוחלת החיים של מקור האור במיקרוסקופ הפלורסנט מוגבלת, ויש לבדוק את הדגימה באופן מרכזי כדי לחסוך זמן ולהגן על מקור האור. כשמזג האוויר חם יש להוסיף מאוורר חשמלי כדי להפיג חום ולהתקרר. בהחלפת נורה חדשה יש לרשום את זמן השימוש מההתחלה. כאשר המנורה כבויה ורוצה להשתמש בה שוב, עליה להמתין עד שהנורה תתקרר לגמרי לפני הדלקת. הימנע מהצתת מקור האור מספר פעמים.
(6) התבונן בדגימה מיד לאחר הצביעה, שכן הקרינה פוחתת בהדרגה עם הזמן. אם הדגימה מאוחסנת בשקית ניילון מפוליאתילן ב-4 מעלות, היא יכולה לעכב את זמן הנחתת הקרינה ולמנוע את התאדות חומר ההרכבה.
(7) תקן השיפוט לבהירות הקרינה מחולק בדרך כלל לארבע רמות, כלומר "אחת" - קרינה חלשה ללא או נראית לעין. פלוס - ניתן לראות רק פלואורסצנטי גלוי בבירור. פלוס פלוס - גלוי עם פלואורסצנטי בהיר. ' פלוס פלוס פלוס ' - פלואורסצנטי גלוי ומסנוור.
