עקרון ותפעול של מיקרוסקופ Darkfield
① למיקרוסקופ שדה אפל יש מעצור אטום במרכז המעבה שלו. זה מונע מאור תאורה ישיר להיכנס לעדשת האובייקטיב; נאסף רק אור המוחזר ומתעקם על ידי הדגימה. כתוצאה מכך, הרקע של שדה הראייה נראה כהה בעוד קצוות הדגימה בהירים. מיקרוסקופ זה יכול לחשוף חלקיקים קטנים עד 4-200 ננומטר, ברזולוציה גבוהה עד פי 50 מזו של מיקרוסקופ שדה בהיר רגיל.
② עקרון מיקרוסקופ השדה האפל שונה ממיקרוסקופ אופטי רגיל המבוסס על אפקט Tyndall. מעבה השדה האפל חוסם את האלומה המרכזית ממקור האור כך שאור לא יכול לנוע ישר כלפי מעלה דרך הדגימה אל המטרה. במקום זאת, האור מופנה כדי להאיר את הדגימה באלכסון. הדגימה מחזירה או מפזרת את האור הנכנס, והאור המפוזר נכנס לאובייקט, ויוצר רקע כהה על פני כל שדה הראייה.
③ היקף היישום מיקרוסקופ שדה כהה משמש בדרך כלל לתצפית על דגימות שקופות לא מוכתמות. לדגימות כאלה יש מקדם שבירה קרוב לזה של המדיום שמסביב וקשה להבחין בהן תחת תאורת שדה בהיר רגילה. תאורת שדה כהה משפרת את הניגודיות בין הדגימה לרקע. זה יכול לזהות חלקיקים עד 4-200 ננומטר. עם זאת, הוא מראה רק את הנוכחות, התנועה ותכונות פני השטח של אובייקטים ואינו יכול לפתור את המבנים הפנימיים העדינים שלהם.
④ נהלי הפעלה
(1) התקן את מעבה השדה האפל על מחזיק המעבה של המיקרוסקופ.
(2) השתמש במקור אור בהיר. הימנע מאור ישיר שנכנס אל המטרה; בדרך כלל משתמשים במנורת מיקרוסקופ ייעודית.
(3) הניחו טיפה של שמן ארז בין הקבל לשקופית הדגימה. זה מונע השתקפות פנימית מוחלטת של אור על פני הקבל, שאחרת לא יצליח להאיר את הדגימה לצורך תצפית בשדה כהה.
(4) הרם או הורד את המעבה כדי למקד את אלומת האור החרוטית שלו אל הדגימה. אם המעבה מצויד בבקרות תנועה אופקיות ומרוכז, בצע תחילה ריכוך כדי ליישר את הציר האופטי של המעבה בדיוק עם זה של המיקרוסקופ. (5) בחר יעד המותאם למעבה, כוונן את המיקוד והבא את תמונת דגימת היעד לעין.
