מדידת נפח בלוק רקמות באמצעות מיקרוסקופים ביולוגיים
עד כה, קריופיקסציה, חתך קפוא במיוחד-דק וייבוש- בהקפאה הן שיטות שגרתיות למיקרוסקופ- של רקמות ותאים. אנא ספק את הפרטים הבאים לגבי שיטה זו:
מיקרוסקופ ביולוגי עם זרקור יכול להזיז את הזרקור למעלה ולמטה כדי להשיג בהירות מתונה, וניתן לשנות גם את הצמצם של הצמצם המשתנה כדי להשיג בהירות מתונה. אם האור הוא מהשמש, ניתן להעלות את הזרקור בצורה מתאימה ולהגדיל את הצמצם של האור המשתנה בצורה מתאימה. אם האור חזק מדי, ניתן להנמיך את הזרקור כראוי, ולהקטין את צמצם הצומת כראוי. אם אתה עדיין מרגיש מסנוור במצב זה, אתה יכול לבחור למקם פילטר מתאים על התושבת מתחת לזרקור. אלון זה יכול להשיג בהירות שמספקת אותך. כמובן, התאמת המיקום העליון והתחתון של הזרקור יכולה לשנות את גודל הצמצם של קריאת האור ולבחור מסננים מתאימים, מה שמצריך תקופה מסוימת של תרגול וניסיון.
נושא חשוב מאוד במיקרוסקופיה ביולוגית הוא תהליך הדגימה ובידוד התאים. לאחר ייבוש-הקפאה והטבעת שרף (FD), יש לעבד את החלקים הדקים האולטרה-הקפואים בקפידה כדי להבטיח שתוכן 65 האלמנטים של כל חלק לא ייפגע במהלך תצפית וניתוח. בשל השלבים הרבים והעלות הגבוהה הכרוכים במיקרואנליזה של-רנטגן, חבל להסיק מסקנות שגויות אם התאים המנותחים פגומים או מתים לאחר עיבוד ממושך ורב-שלבי. לתאי שריר הלב המופרדים על ידי טיפול בג'לטינאז יש שתי צורות, האחת בצורת מוט ארוך - והשניה עגולה. האחרון מתייחס לתאים גוססים שנפגעים במהלך תהליך הפרדת התאים.
התוכן וההפצה של אלקטרוליטים בשני סוגי תאים אלה שונים מאוד במיקרוסקופ ביולוגי. Na גבוה מאוד ו-K נמוך במיוחד בקרדיומיוציטים מעגליים, וריכוז Ca בדנדריטים ליניאריים גבוה מאוד. לאחר אימות בשיטות אנליטיות אחרות, הוכח שה-Na הגבוה וה-K הנמוך בתאים מעגליים וה-Ca הגבוה במיטוכונדריה הם תוצאה של נזק לממברנה במהלך הפרדת התאים. שיטת הקיבוע הקור לתאים ורקמות כרוכה לעתים קרובות בכיבוי תחילה ולאחר מכן אחסונם בחנקן נוזלי. קיבוע מרווה הוא קריטי לאפקט השימור. תאים חיים או רקמות טריות עשירות במים, וכאשר מכבים אותם, חלקי התאים או הרקמות שבאים במגע ישיר עם הקירור (במיוחד בעת שימוש בחנקן נוזלי לקירור) מוקפאים ומקובעים תחילה, ויוצרים "קליפה" שמפריעה לחלק המרכזי של התאים להיגרס ולקיבוע. לכן, כאשר עורכים מיקרואנליזה של קרני X-, נמצא לעתים קרובות שגבישי קרח קיימים בחלק המרכזי של תאים גדולים יותר. כדי למנוע מצב זה לקרות, חומר עם נקודת התכה גבוהה יותר מחנקן נוזלי אך נמוך ב-806c משמש כחומר קירור. יש הרבה מהחומרים האלה, אבל הם קלים להשגה והמחיר המשתלם ביותר הוא פרופאן מרוכז (נקודת רתיחה 42.120c, נקודת התכה 187.10c, משקל מולקולרי 44.1), שגם לו קצב קירור מהיר. אבל החיסרון שלו הוא שהוא דליק.
