מבוא ליתרונות המשופרים של מיקרוסקופיית סריקת לייזר מרובי -פוטון
מיקרוסקופ סריקת לייזר רב-פוטון הוא שיפור משמעותי של המיקרוסקופיה האופטית, המתבטאת בעיקר ביכולת לצפות במבנים עמוקים של תאים חיים, תאים קבועים ורקמות, ולקבל ברורים וחדים רב שכבתיים Z-מטוס, כלומר פרוסות אופטיות, אשר ניתן להשתמש בו כדי לבנות מבנים מוצקים תלת ממדיים של מפרטנים. מיקרוסקופ קונפוקלי משתמש במקור תאורת לייזר, המורחב כדי למלא את כל המוקד המוקד של העדשה האובייקטיבית, ואז מתכנס לנקודות קטנות מאוד במישור המוקד של הדגימה דרך מערכת העדשה של העדשה האובייקטיבית. על פי הצמצם המספרי של העדשה האובייקטיבית, קוטר נקודת ההארה הבהירה הוא בערך 0. 25-0. 8 מיקרומטר, והעומק הוא בערך 0. 5-1. 5 מיקרומטר. גודל הנקודה הקונפוקלית נקבע על ידי תכנון המיקרוסקופ, אורך גל לייזר, מאפיינים אובייקטיביים, הגדרות מצב יחידת יחידת יחידות ותכונות דגימה. טווח ההארה והעומק של מיקרוסקופ שדה הם גדולים, בעוד שהארת מיקרוסקופ קונפוקלי מתמקדת במוקד במישור המוקד. היתרון הבסיסי של מיקרוסקופיה קונפוקלית הוא בכך שהוא יכול לבצע חתך אופטי עדין על דגימות פלורסנט עבות (עד 5 0 מיקרומטר ומעלה), בעובי של כ- 0.5 עד 1.5 מיקרומטר. ניתן להשיג את סדרת תמונות הפרוסה האופטית על ידי העברת הדגימה למעלה ולמטה באמצעות מנוע צעד ציר Z של המיקרוסקופ. אוסף מידע על התמונה נשלט במישור * *, ללא הפרעה מאותות שנפלטו ממיקומים אחרים בדגימה. לאחר הסרת ההשפעה של פלואורסצנט הרקע והגדלת יחס האות לרעש, משופרים משמעותית את הניגודיות והרזולוציה של תמונות קונפוקליות בהשוואה לתמונות פלואורסצנטיות תאורת שדה מסורתיות. בדגימות רבות, רכיבים מבניים מסובכים שזורים זה בזה ליצירת מערכות מורכבות, אך ברגע שניתן לאסוף מספיק קטעים אופטיים, אנו יכולים להשתמש בתוכנה כדי לשחזר אותם בשלושה ממדים. שיטה ניסיונית זו הייתה בשימוש נרחב במחקר ביולוגי כדי להבהיר את הקשר המבני והפונקציונאלי המורכב בין תאים או רקמות.
