כיצד לקרוא את התוצאות של מיקרוסקופ פלואורסצנטי באמצעות טונל כדי לזהות אפופטוזיס
1. שימו לב לשלוש נקודות בהתבוננות בתוצאות, שיטת האפי-הקרנה, הקרנת הרזולוציה והטיפול בפילטר. באופן ספציפי:
שיטת ההארה היא בדרך כלל אפיסקופית, כלומר מקור האור מוקרן על המדגם דרך עדשת האובייקטיב;
מקור האור הוא אור אולטרה סגול, אורך הגל קצר יותר והרזולוציה גבוהה מזו של מיקרוסקופים רגילים;
ישנם שני מסננים מיוחדים, זה שלפני מקור האור משמש לסינון אור נראה, וזה שבין העינית לעדשת האובייקטיב משמש לסינון קרניים אולטרה סגולות כדי להגן על עיני האדם.
שנית, מיקרוסקופ הפלורסנט המשמש למדידת אפופטוזיס על ידי מנהרה הוא גם סוג של מיקרוסקופ אופטי, ההבדל העיקרי הוא שאורכי גל העירור של השניים שונים. זה קובע את ההבדל בין מיקרוסקופ פלואורסצנטי למיקרוסקופ אופטי רגיל מבחינת מבנה ושימוש. מיקרוסקופ פלואורסצנטי הוא כלי חיוני בציטוכימיה אימונופלואורסנטית. הוא מורכב ממרכיבים עיקריים כגון מקור אור, מערכת לוחות סינון ומערכת אופטית. זה להשתמש באורך גל מסוים של אור כדי לעורר את הדגימה כדי לפלוט פלואורסצנטי, ולצפות בתמונת הקרינה של הדגימה על ידי הגברה של עדשת האובייקט והעינית.
3. פלטת פילטר מדוכאת פלואורסצנטי למדידת אפופטוזיס ב-tunel תפקידה של לוח המסנן המדוכא הוא לחסום לחלוטין את מעבר אור העירור ולספק פלואורסצנטיות בטווח אורכי הגל המתאים. בהתאם ללוחית מסנן העירור, נעשה שימוש נפוץ בשלושת הסוגים הבאים של לוחות סינון דחוסים:
פלטת מסנן לוחצת אור אולטרה סגול: היא יכולה להעביר אור נראה ולחסום אור אולטרה סגול מלעבור. ניתן לשלב עם UG-1 או UG-5. בשימוש נפוץ GG-3K430 או GG-6K460.
פלטת סינון דיכוי אור כחול סגול: יכולה להעביר אור באורך גל מעל 510nm (ירוק לאדום), וניתנת לשילוב עם BG-12. בדרך כלל נעשה שימוש ב-OG-4K510 או OG-1K530.
לוח מסנן לחיצת אור אולטרה סגול: יכול להעביר אור באורך גל מעל 460nm (כחול לאדום), ניתן לשלב עם BG-3, בשימוש נפוץ OG-11K470AK 490, K510.
