כיצד לבחור מיקרוסקופ פלואורסצנטי מתאים
מיקרוסקופ פלואורסצנטי הוא ציוד הדמיה מיקרוסקופי סטנדרטי במחלקות מעבדות ופתולוגיה, המשתמש במאפייני פלואורסצנציה לתצפית והדמיה. הוא נמצא בשימוש נרחב בתחומים שונים כמו ביולוגיה של תאים, נוירוביולוגיה, בוטניקה, מיקרוביולוגיה, פתולוגיה, גנטיקה וכו '. הדמיית פלואורסצנציה היא בעלת היתרונות של רגישות גבוהה וספציפיות, מה שהופך אותה למתאימה מאוד לתצפית על התפלגות של חלבונים ספציפיים, איברים וכו'.
בחירת מקור האור הניאון
מקורות האור הפלואורסנטיים הנפוצים כוללים כיום מנורות כספית, מנורות הליד מתכת ומקורות אור LED המתפתחים במהירות בשנים האחרונות. הספקטרום של מקורות אור פלואורסצנטי יכול להיות רציף או רציף, והאנרגיה משתנה בלהקות שונות. מקורות אור LED הופכים בהדרגה למקור האור העיקרי למיקרוסקופים פלואורסצנטיים בגלל הלהקות הספקטרליות הצרות יחסית שלהם, תפוקת אנרגיה יציבה יותר, תוחלת חיים ארוכה יותר וידידותי בטיחות וידידות סביבתית רבה יותר.
מיקרוסקופ קונפוקלי
בתצפית מיקרוסקופיה פלואורסצנטית מסורתית, עקב חפיפה של חומרים לתיוג פלואורסצנטי ומבני פלואורסצנט ספונטניים, הם קשורים זה לזה. עם זאת, יעדי המיקרוסקופיה המסורתית של Epifluorescence לא רק אוספים אור ממישור המוקד, אלא גם אוספים אור מפוזר מעל ומתחת למישור המוקד, וכתוצאה מכך מופחתים מאוד רזולוציית תמונה וניגודיות.
הדמיה קונפוקלית מגלה רק את חלק האור המשתקף מהמטוס המוקד, ובכך פותר את הבעיה לעיל. מקור האור יוצר נקודה קטנה ועדינה במישור המוקד דרך חור חור, והאור הנפלט ממישור המוקד נאסף על ידי העדשה האובייקטיבית. מרבית הקרינה הנפלטת מנקודות מעל או מתחת למישור המוקד של העדשה האובייקטיבית אינה יכולה להתכנס אל חור החור. רק הקרינה הממוקמת על מישור המוקד וחלק קטן של פלואורסצנציה ממוקדת יכולה לעבור דרך חור החור, ואילו קרן האור מחוץ למישור המוקד מתכנסת מלפנים או מאחורי צלחת החור ונחסמת מכניסה לגלאי דרך חור הסינה. התמונה שהתגלתה היא התמונה ממישור המוקד, ולכן איכות התמונה הסופית משופרת מאוד.
בשל היתרונות והפרקטיות השונים של סריקת לייזר מיקרוסקופיה קונפוקלית, מיקרוסקופיה קונפוקלית היא כיום עוזרת ניסיונית חיובית בתחומי הדיוק הגבוה של ביולוגיה של תאים, בוטניקה ומחקר תאים. יחד עם זאת, במרכזי מחקר מדעיים עתידיים, זה יהיה הכלי המחקר הבסיסי ביותר והליבה.
