ההבדל בין מיקרוסקופ פלואורסצנטי למיקרוסקופ קונפוקאלי לייזר
מיקרוסקופ פלורסנט
1. מיקרוסקופ הקרינה משתמש באור אולטרה סגול כמקור האור, המשמש להקרנת האובייקט שזוהה כדי לגרום לו לפלוט פלואורסצנטי, ולאחר מכן לצפות בצורתו ובמיקום האובייקט מתחת למיקרוסקופ. מיקרוסקופ פלואורסצנטי משמש לחקר הספיגה, ההובלה, ההפצה והמיקום של חומרים כימיים בתאים. חלק מהחומרים בתאים, כמו כלורופיל, יכולים להקרין לאחר שהוקרנו על ידי קרניים אולטרה סגולות; חומרים אחרים אינם יכולים להאיר בעצמם, אך הם יכולים להאיר לאחר צביעה בצבעים פלואורסצנטיים או בנוגדנים פלואורסצנטיים והוקרנו בקרניים אולטרה סגולות. מיקרוסקופ פלואורסצנטי הוא אחד הכלים למחקר איכותני וכמותי על חומרים אלו.
2, עקרון מיקרוסקופ פלואורסצנטי:
(א) מקור אור: מקור האור מקרין אור באורכי גל שונים (מאולטרה סגול ועד אינפרא אדום).
(ב) מקור אור מסנן עירור: העברת אור באורך גל מסוים שיכול לגרום לדגימה להקרין, תוך חסימת אור שאין בו תועלת לקרינת עירור.
(ג) דגימות פלואורסצנטיות: מוכתמות בדרך כלל בפיגמנטים ניאון.
(ד) מסנן חוסם: חוסם אור עירור שלא נספג על ידי הדגימה כדי להעביר פלואורסצנטי באופן סלקטיבי, וכמה אורכי גל בקרינה מועברים גם הם באופן סלקטיבי. מיקרוסקופ המשתמש באור אולטרה סגול כמקור האור כדי לגרום לאובייקט המוקרן לפלוט פלואורסצנטיות. מיקרוסקופ האלקטרונים הורכב לראשונה על ידי קנוהל והרוסקה בברלין בשנת 1931. מיקרוסקופ זה משתמש בקרן אלקטרונים מהירה במקום בקרן אור. מכיוון שאורך הגל של זרימת האלקטרונים קצר בהרבה מזה של גל האור, ההגדלה של מיקרוסקופ אלקטרונים יכולה להגיע פי 800 אלף, ומגבלת הרזולוציה המינימלית היא 0.2 ננומטר. מיקרוסקופ האלקטרונים הסורק, שהחל להשתמש בו ב-1963, יכול לגרום לאנשים לראות את המבנים הזעירים על פני השטח של עצמים.
3. היקף היישום: משמש להגדלת התמונה של חפצים זעירים. זה מיושם בדרך כלל על תצפית של ביולוגיה, רפואה וחלקיקים מיקרוסקופיים.
מיקרוסקופ קונפוקאלי
1. מיקרוסקופ קונפוקאלי מוסיף עדשה חצי רפלקטיבית למחצה על הנתיב האופטי של האור המוחזר, אשר שוברת את האור המוחזר שעבר בעדשה לכיוונים אחרים. בפוקוס שלו, יש לולאה עם חריר, וחור החריר ממוקם במוקד. מאחורי הבלאט נמצא צינור פוטו-מכפיל. ניתן לדמיין שהאור המוחזר לפני ואחרי הפוקוס של אור הזיהוי עובר דרך מערכת קונפוקלית זו, ולא יתמקד בחור הקטן, אלא יחסום על ידי הבלאט. אז הפוטומטר מודד את עוצמת האור המוחזר במוקד.
2. עיקרון: המיקרוסקופ האופטי המסורתי משתמש במקור האור השדה, והתמונה של כל נקודה בדגימה תהיה מופרעת על ידי עקיפה או אור מפוזר של הנקודות הסמוכות; המיקרוסקופ הקונפוקאלי הסורק בלייזר סורק כל נקודה במישור המוקד בדגימה באמצעות מקור האור הנקודתי שנוצר על ידי קרן הלייזר העוברת דרך חריר ההארה. הנקודה המוקרנת על הדגימה מצטלמת בחריר הזיהוי, הנקלט נקודה אחר נקודה או שורה אחר נקודה על ידי צינור פוטו-מכפיל (PMT) או התקן מצמד קר (cCCD) לאחר זיהוי החור, ותמונה ניאון נוצרת במהירות על מסך צג המחשב. חריר ההארה וחור הזיהוי מצומדים ביחס למישור המוקד של עדשת המטרה, והנקודות במישור המוקד מתמקדות בחריר ההארה ובחור הפליטה בו-זמנית, והנקודות מחוץ למישור המוקד לא להצטלם בחריר הזיהוי, כך שהתמונה הקונפוקלית המתקבלת היא החתך האופטי של הדגימה, שמתגבר על הפגם של התמונה המטושטשת של המיקרוסקופ הנפוץ.
3. תחומי יישום: הכוללים רפואה, חקר בעלי חיים וצמחים, ביוכימיה, בקטריולוגיה, ביולוגיה של התא, רקמות ועוברים, מדעי המזון, גנטיקה, פרמקולוגיה, פיזיולוגיה, אופטיקה, פתולוגיה, בוטניקה, מדעי המוח, ביולוגיה ימית, מדעי החומרים, מדע אלקטרוני, מכניקה, גיאולוגיה נפט ומינרלוגיה.
