יתרונות וחסרונות של מיקרוסקופיה בלייזר רב-פוטוני (MLSM)
מיקרוסקופ סריקת לייזר מולטיפוטון היא שיטה ניסיונית המבוססת על טכנולוגיית מיקרוסקופיה סריקת לייזר, המספקת יכולות חיתוך אופטיות טובות יותר לתצפית תלת מימדית. שיטת עירור הקרינה הרב-פוטונים משתמשת באור אדום באורך גל ארוך או באור קרוב לאינפרא אדום כדי לאסוף תמונות פלואורסצנטיות ברזולוציה גבוהה של דגימות, מה שגורם נזק מינימלי לדגימות חיות. לכן הוא מתאים להדמיית תאים חיים, בעיקר רקמות חיות עבות כמו פרוסות מוח, עוברים וכו'. מחקרי הדמיה של איברים שלמים או אפילו גופים שלמים.
היתרונות הם כדלקמן:
1. השתמשו באור אדום או באור אינפרא אדום כדי לעורר, ופיזור האור קטן (הפיזור של חלקיקים קטנים הוא ביחס הפוך לחזק הרביעי של אורך הגל).
2. אין צורך בחריר, וניתן לאסוף פוטונים מפוזרים יותר מחתך ההדמיה.
3. החריר אינו יכול להבחין בפוטונים מפוזרים הנפלטים מהאזור הבלתי ממוקד או מאזור המיקוד, ויחס האות לרעש של הדמיה מרובה פוטונים בשכבות עמוקות הוא טוב.
4. האור האולטרה סגול או הנראה המשמש לעירור פוטון בודד נספג ומוחלש בקלות על ידי המדגם לפני שהקרן מגיעה למישור המוקד, וקשה לעורר שכבות עמוקות.
5. מבחינת תצפית במיקרוסקופ ביולוגי, השיקול הראשון הוא לא לפגוע במצב הפעיל של האורגניזם עצמו ולשמור על זרימת מים, ריכוז יונים, חמצן וחומרי הזנה. במקרה של תצפית באור, הן חום והן אנרגיית הפוטונים חייבות להישאר בתוך כמות הקרינה ואנרגיית האור שהתאים לא ייפגעו.
6. למיקרוסקופיה מולטיפוטונים יש גם יתרונות רבים. לדוגמה, מבחינת רזולוציה תלת מימדית, חדירת עומק, יעילות פיזור, אור רקע, יחס אות לרעש, בקרה וכו', ישנם מאפיינים טרנסצנדנטיים שלא היו או לא יכלו להתאים למיקרוסקופי לייזר קודמים.
מיקרוסקופ סריקת לייזר קונפוקלית רב-פוטונים הורחבה לתחומי מחקר ויישומים שונים. הוא יכול לבצע תצפית תלת מימדית לא הרסנית של דגימות במצבן הטבעי, ויכול לשפר את הרזולוציה ויחס האות לרעש של המערכת. שימוש בחומרי עירור רב-פוטונים שינויים במאפיינים יכולים גם לממש אחסון נתונים תלת מימדי בגובה ועיבוד מיקרו תלת מימדי בכל כיוון, שיש לו ערך יישום גבוה. מאמינים כי עם המשך הפיתוח של מכונות, חומרים, טכנולוגיית לייזר וכו' הקשורים למיקרוסקופיה קונפוקלית רב-פוטונים, מיקרוסקופיה סריקת לייזר קונפוקלית פוטונית יותר תקבל פיתוח גדול יותר ויישום רחב יותר.
החסרונות הם כדלקמן:
1. זה יכול רק לדמיין פלואורסצנטי.
2. אם הדגימה מכילה כרומופורים שיכולים לספוג אור עירור, כגון פיגמנטים, הדגימה עלולה להינזק מחום.
3. הרזולוציה מופחתת מעט. למרות שניתן לשפר אותו על ידי שימוש בחורים קונפוקאליים בו זמנית, יהיה אובדן אות.
4. מוגבל על ידי לייזרים מהירים במיוחד, העלות של מיקרוסקופים סריקת מולטיפוטונים גבוהה יחסית.
