התאמה של מערכת נתיב אופטי הדמיה של מיקרוסקופ אור ומתווה של בדיקה מיקרוסקופית
התאמה של מערכת נתיב אופטי הדמיה ומתווה בדיקה מיקרוסקופית
התאמת מערכת ההדמיה האופטית של מיקרוסקופ מתבצעת בהתאם לצרכים של טכניקות מיקרוסקופיה שונות. מה שנקרא מיקרוסקופיה, בקצרה, היא שיטת ההארה בה משתמשים בהתבוננות בדגימה דרך מיקרוסקופ, והטכניקה והשיטה להשגת ניגודיות טובה יותר בתמונה שנוצרת על ידי הדגימה. להלן מתאר בקצרה את המיקרוסקופיה הבשילה במספר שיטות ואת שיטת התאמת המערכת האופטית של הדמיה במיקרוסקופ.
1. שדה בהיר שידור:
זוהי שיטת היישום המסורתית והנפוצה ביותר מאז המצאת המיקרוסקופ. רכיבים בסיסיים: א. עדשת אובייקטיבית: ניתן להשתמש בכל עדשת אובייקטיבית לתצפית שדה בהירה; ב. משקפי איכון: ניתן להשתמש בכל מיני משקפי איכון, רצוי מצוידים בדאפרגמת צמצם. שיטת התאמה: לאחר התאמה של מערכת התאורה Kuhler של המיקרוסקופ לעיל, ניתן ליישם את שיטת השדה הבהיר. היקף היישום: כל חתכי הרקמה המוכתמים, מריחות דם וכו' אמצעי זהירות: א. בעת שימוש בשיטת השדה הבהיר של תצפית, יש להתאים את מערכת התאורה של Kuhler; ב. אין לפתוח את הדיאפרגמה של שדה הראייה באופן שרירותי, ויש להציב את העדשה הקדמית של מראת המעבה באופן עובדתי החוצה ולתוך הנתיב האופטי בהתאמה כאשר משתמשים בעדשות האובייקטיב של 10×, פחות מ-10×, ויותר מ-10 ×; ג. אין להשתמש בסרעפת הצמצם של מראת המעבה כדי לכוונן את בהירות שדה הראייה, ואין לכוון את גובה מראת המעבה ללא הבחנה, או שהרזולוציה של המיקרוסקופ תופחת ורזולוציית הרקמה המוכתמת. ייפגע. רזולוציית המיקרוסקופ והנזק הותאמו למערכת התאורה של Kuhler; ד. עבור מיקרוגרפים, כל שינוי בשימוש בהגדלה של עדשת האובייקטיב, עליך להתאים את דיאפרגמת הצמצם של עדשת הקבל, כך שגודלה יהיה שווה בדיוק לצמצם המספרי המשמש בעדשת האובייקטיב של 2/3.
2. שיטת ניגודיות שלב האור המשודר:
זוהי בדיקת מיקרוסקופ מודרנית של שיטת שיפור ניגודיות. רכיבים בסיסיים: עדשת אובייקטיבית ניגודיות פאזה, שדה ראייה בהיר וטווח ניגודיות פאזה רב תכליתי, טלסקופ מיקוד, מסננים ירוקים.
שיטות התאמה:
א. בהתבסס על ההתאמה של מערכת התאורה Kuhler, מקד את המדגם בבירור באמצעות שיטת השדה הבהיר
ב. סובב את טווח האיתור ל-Ph1 כדי ליישר את מיקום קנה המידה של החוגה, בחר בעדשת אובייקטיבי ניגודיות 10 × פאזה, והחלף את המדגם השקוף שיש לצפות בו.
ג. נתקו את אחת העיניות, החליפו אותה בטלסקופ ממורכז והתמקדו בשתי הטבעות הניגודיות הפאזיות בשדה הראייה (טבעת ניגוד הפאזה השחורה של עדשת האובייקטיבית וטבעת הניגוד של שלב העברת האור של עדשת הקבל).
ד. ייתכן ששתי טבעות הניגודיות הפאזיות בשדה הראייה אינן בהכרח חופפות, כוונן את שני התקני הכוונון בהיקף האיתור (התאמת המצבים השמאלי והימני של ידית כוונון הטבעת ניגודיות הפאזה והתאמת המצבים הקדמיים והאחוריים של כפתור החיכוך) , כך שטבעת העברת האור מלפנים ומאחור ימינה ושמאלה תחפוף לטבעת השחורה
ה. לאחר ההתאמה, שנה חזרה לעינית לצורך התבוננות ולחץ על המסנן הירוק לנתיב האופטי כדי לצפות בתמונת ניגודיות הפאזה של המדגם.
ו. כאשר יש עדשות אובייקטיביות של 20× ו-40× לתצפית, יש להגדיר את עדשת התצפית על מיקום Ph2, ובשימוש ב-100 עדשות אובייקטיביות, יש להגדיר את עדשת הזיהוי על מיקום Ph3.
היקף היישום: זה מתאים לצפייה בדגימות שקופות, לא מוכתמות או לא ניתנות להכתמה, כגון כל מיני תאים, רקמות חיות, חלקי רקמה לא מוכתמים או לא מוכתמים, אורגניזמים מימיים וכן הלאה.
3. שיטת ניגודיות פאזה דיפרנציאלית:
על מנת להתגבר על שיטת ניגודיות הפאזה של התבוננות בפרטי הדגימה סביב התמונה בליווי הילה, יסווה את הפרטים שהיו צריכים להיראות, כמו גם דגימות או חתכי רקמה דורשים עובי דק למדי, באופן עקרוני, יכול להיות עבה מ-10? מטר ומגבלות אחרות, השימוש בעקרון של הפרעות קרן כפולה לתכנון שיטת ניגודיות פאזה תת-דיפרנציאלית.
שיטות התאמה:
א. יש להתאים את שיטת DIC על בסיס שמערכת Kulemin כבר מותאמת
ב. באמצעות עדשת אובייקטיבית 10×, קבע את מיקום המיקוד של עדשת האובייקטיב שיכולה לראות את הדוגמה בבירור עם שדה ראייה בהיר.
ג. הנח את המקטב בנתיב ההארה, שים לב שהוא צריך להיות מכוון בכיוון מזרח-מערב.
ד. סובב את חוגת הקבל למצב המתאים לשימוש בעדשת האובייקטיב 10 ×, כלומר, DIC 0.3-0.4.
ה. הכנס את המחוון DIC עבור עדשת האובייקטיב 10× בחלק האחורי של עדשת האובייקטיב או על ממיר האובייקטיב.
ו. הכנס את המנתח לנתיב האופטי של ההדמיה, ושימו לב שהכיוון שלו צריך להיות דרום-צפון.
ז. החלף את המדגם השקוף שיש לצפות בו, הפעל את מקור האור כדי למקד את המדגם בבירור.
ח. כוונן את הוספת ה-DIC כך שתמונת ניגודיות ההפרעות הדיפרנציאלית כדי להשיג את האפקט הטוב ביותר, כלומר, אפקט ההקלה הברור ביותר.
אני. במקביל, התאם את דיאפרגמת הצמצם של מראת המעבה, כך שגם השפעת הניגודיות תהיה אופטימלית.
י. לאחר מכן כוונן את הפרטים של המדגם כדי לראות את מבנה המדגם ברמות שונות.
ק. אם מכניסים את הצבע המשלים (לוחית פיגור אדומה מסדר ראשון) ומכוונים את ה-DIC בו-זמנית, ניתן לראות את הצבעים המבריקים המשתנים ללא הרף בשדה הראייה, עם אדום, כתום, צהוב, ירוק, כחול, סגול, ורוד, ורוד-סגול וזהוב-צהוב. היקף היישום: קטעי רקמה שקופים או שאינם ניתנים להכתמה, עובי של עד כ-100?מ', רקמה חיה ותאים חיים בתרבית, אורגניזמים חיים קטנים וכן הלאה.
