שימוש נכון במיקרוסקופ פלואורסצנטי הפוך
מיקרוסקופ פלואורסצנטי הפוך הוא מיקרוסקופ רב תכליתי המשמש ב-תחום הגבוה של מחקר מדעי ביולוגי. המבנה שלו מורכב ויקר. לכן, על מנת שסטודנטים לתואר שני ברפואה ישלטו בצורה נכונה בפעולה וישתמשו במפרטים של מיקרוסקופ פלואורסצנטי הפוך, על המורים לספק תחילה קורס על הידע הבסיסי של מיקרוסקופ פלואורסצנטי הפוך לפני הדגמת הפעולה בפועל של מיקרוסקופ פלואורסצנטי הפוך, הצגת המבנה, העיקרון, התפקוד ושיטות השימוש הבסיסיות של פלואורסצנטי הפוך. לאחר מכן, בניתוח הספציפי, מוצגות פונקציות שונות עבור דגימות שונות, תוך סטנדרטיזציה הדרגתית של הפעולה והשימוש במיקרוסקופ פלואורסצנטי הפוך על ידי סטודנטים לתואר שני ברפואה.
1. שימוש נכון בתצפית ראייה ברורה. אחד הפונקציות של מיקרוסקופ פלואורסצנטי הפוך הוא תצפית שדה בהירה. העיקרון הבסיסי שלו הוא שאחרי שהדגימה מוקרנת באור, חלקים שונים סופגים אור בצורה שונה כדי להשיג הדמיה ברקע בהיר. הוא מתאים בעיקר לצפייה בדגימות כגון תאים מוכתמים וחתכי רקמה בעלי צבע משלהם.
2. שימוש נכון בתצפית דיפרנציאלית. הפונקציה השנייה של מיקרוסקופ פלואורסצנטי הפוך היא תצפית על הבדלי פאזה. העיקרון הבסיסי שלו הוא להמיר את הפרש הנתיב האופטי של חלקים שונים של הדגימה להפרש משרעת, הנצפה באמצעות עדשת אובייקטיבית הפרש פאזה עם לוחית פאזה ועדשת מעבה עם צמצם עגול. זה מתאים בעיקר לצפייה בתאים חיים או קטעי רקמה לא מוכתמים. בתהליך ההוראה הניסיונית, בנוסף להנחיית סטודנטים לתואר שני ברפואה לעקוב בצורה נכונה אחר שיטות הפעולה הבסיסיות של צפייה בהפרשי פאזות, חשוב יותר להנחות אותם להבין ולשלוט בדגימות באמצעות תצפית על הבדלי פאזות. עבורם, השיטה הנפוצה ביותר במחקר מדעי עתידי היא תצפית מיקרוסקופית של תאים מתורבתים. ראשית, לבחירת ציוד התא, מומלץ בדרך כלל להשתמש בכלי תרבית מזכוכית ופלסטיק, צלחות ובקבוקים. הם לרוב חסרי צבע ושקופים, וניתן לצפות בהם ישירות תחת מיקרוסקופ פלואורסצנטי הפוך ללא צורך להשליך נוזל התא או לעבור טיפולים אחרים. שנית, במהלך תצפית מיקרוסקופית, אין לפתוח את מכסה הציוד כלאחר יד כדי למנוע זיהום התאים. לבסוף, עבור מפעילים, יש צורך ללבוש כפפות, מסכות ומעילים לבנים, אשר לא רק מגנים על בריאותם אלא גם מונעים זיהום תאים.
