שיטת הכנת שקופיות מיקרוסקופ
ישנן שלוש שיטות להכנת שקופיות מיקרוסקופ:
1. שיטת מריחה
שיטת מריחה היא שיטת הכנה שבה החומר נמרח בצורה אחידה על השקף.
חומרי המריחה כוללים אורגניזמים חד-תאיים, אצות קטנות, דם, תרביות חיידקים, רקמות רופפות של צמחים ובעלי חיים, קני זרע, אנתרים וכו'.
יש לשים לב בעת המריחה:
(1) המגלשה חייבת להיות נקייה.
(2) יש להחזיק את השקף שטוח.
3) הציפוי חייב להיות אחיד. מורחים את טיפת נוזל הציפוי מימין למרכז השקף ומורחים היטב בעזרת להב של סכין מנתח או קיסם וכו'.
4) הציפוי צריך להיות דק. השתמש בשקופית נוספת כדוחף, דחף בעדינות מימין לשמאל לאורך פני השקופית עם טיפת תמיסת היישום (הזווית בין שתי השקופיות צריכה להיות 30 מעלות עד 45 מעלות), ומרח שכבה דקה אחידה.
5) קיבוע. אם יש צורך בקיבוע, השתמש בקיבוע כימי או בקיבוע ייבוש (חיידקי).
6) מכתים. השתמש במתילן כחול לחיידקים ובכתם רייצ'ל לדם. תמיסת הצביעה צריכה לכסות את כל המשטח המצופה.
7) לשטוף. סופגים על נייר סופג או אופים יבשים.
8) אטום את הסרט. לאחסון לטווח ארוך, השתמש בסרט עץ קנדי.
2. שיטת לחיצת סרט
שיטת סרט לחץ היא החומר הביולוגי המונח בין השקופית לגיליון הכיסוי, תוך הפעלת לחץ מסוים, תאי הרקמה יילחצו זה מזה בשיטת הכנה.
(1) לקחת חומר. תצפית על חלוקת תאים, חלוקת תאים צריכה להיבחר שופע, תאי רקמה טריים כחומרים. כגון קצוות שורשים, רקמה מריסטמטית של קצה גזע, תאי מח עצם, אנתרים (תאי אם אבקה). קן זרע (spermatogonia) וכן הלאה.
(2) קיבוע. קיבוע חומר יכול להיקבע על פי הצורך, מיד לאחר נטילת סרט לחץ החומר תצפית, לא יכול לעשות טיפול קבוע נפרד (וכתמה סינכרוני); לקחת את החומר לא מיד לאחר הבדיקה, ניתן לתקן את החומר עם מקבע (בדרך כלל עם מקבע אלכוהול אצטט). קבוע 2 ~ 24 שעות (תלוי בחומר) לאחר כביסה עם 95% אתנול, נשמר ב-70% אתנול, המתנה.
(3) דיסוציאציה. התאים לא קל לפזר את החומר עם תמיסת הפרדת הידרוליזה (כגון 1N HCl או תמיסת חומצה הידרוכלורית ותמיסת אלכוהול), טיפול כללי 6 ~ 20 דקות, לאחר פירוק ושטיפה במים לפני צביעה.
(4) מכתים. ישנם סוגים רבים של כתמים. תצפית על כרומוזומים משמשת בדרך כלל לצביעה בתמיסת צביעה מגנטה אצטט.
(5) לחיצת סרט. הניחו את החומר על שקף, הוסיפו טיפת מים או תמיסת צביעה, כסו את כיסוי הכיסוי ולחץ בעדינות על השקף עם האגודל.
(6) תצפית. לאחר לחיצה על הסרט, ניתן לצפות בו מתחת למיקרוסקופ.
