פונקציות של כל מסנן במיקרוסקופ פלואורסצנטי
הנושא הקריטי ביותר במיקרוסקופ פלואורסצנטי הוא השילוב של מסננים אופטיים. גם מסנן העירור וגם מסנן המיגון חייבים להיות מתאימים לחומר הפלורסנטי הנצפה ולהתאים זה לזה. עבור יישומים ספציפיים מסוימים, אם יש שגיאות בבחירת מסננים, זה עלול להוביל לאי הבנות ואף לתוצאות שגויות. ההישגים של טכנולוגיית מיקרוסקופיה פלואורסצנטית אינם ניתנים להפרדה ממסננים באיכות גבוהה- וקבוצות מסננים מותאמות בחוכמה. ישנם מספר סוגים של מסננים למיקרוסקופ פלואורסצנטי.
1. מסנן סופג חום
מסנן סופג חום הוא מסנן הכרחי כדי למנוע מקרינה תרמית בספקטרום מקור האור לפגוע במערכת האופטית. מיקרוסקופים מתקדמים מוקדמים צוידו בבקבוקים בצורת תוף שיכולים להחזיק מים מזוקקים כמכשירים סופגי חום. מיקרוסקופים מודרניים למחקר בקנה מידה גדול- מצוידים במסנני זכוכית סופגי חום בקופסאות אור או בתאי מנורות של מקור אור, שהם יריעות זכוכית שקופות ומעט צהובות. מסנני KG1 (2 מ"מ) ו-BG38 (4 מ"מ) של לייץ יכולים להעביר כמעט את כל ספקטרום האור האולטרה סגול והנראה, עם קצב העברת אור של עד 98%. הוא סופג רק באופן סלקטיבי קרינה פוטותרמית אינפרא אדום.
2. מסנן עירור
מסנני עירור יכולים לספוג באופן סלקטיבי קווים ספקטרליים באורך גל ארוכים ולהעביר רק אור אולטרה סגול. מסנני אור סגול, כחול וירוק הם מסנני עירור. Zeiss, Reichert, Olympus סדרת B, סדרת G, סדרת BG, סדרת UG של Shott, סדרת H, G, BP של Opton, סדרת BP של Leitz ומסננים אופטיים נוספים הם כולם מסנני עירור.
3. מסנן חוסם
מסנן חוסם הוא מסנן הסופג באופן סלקטיבי קווים ספקטרליים של גלים קצרים וקרני אינפרא אדום תוך שהוא מאפשר לראות גלים ארוכים יותר. תפקידו לאפשר למתבונן לראות את הקרינה הנרגשת מהאובייקט הנבדק, תוך הגנה על הקרנית של הצופה מפני נזקי UV.
4. מסנן הפרדת צבעים
פילטר הפרדת צבע הוא מראה מסנן המשקפת אור עירור על האובייקט הנבדק, וגורמת לאובייקט לפלוט פלואורסצנטי ולאחר מכן מעבירה את הקרינה לעינית. ניתן להשתמש בסוג זה של מסנן רק במעבה של אור נופל, בעוד שמיקרוסקופ פלואורסצנטי של אור מועבר אינו דורש הפרדת צבעים.
5. מסנן הפרעות
מסנן הפרעות הוא סוג של-מסנן עירור בעל ביצועים גבוהים. זהו פילטר המיוצר על ידי ערימת מספר סרטי מתכת דקים בין שתי יריעות זכוכית מלוטשות. מקדם השבירה של כל סרט מתכת דק שונה, כך שהקווים הספקטרליים של אורכי גל שונים של מקור האור ההארה משתקפים שוב ושוב על כל סרט מתכת. חלק מהקווים הספקטרליים באורכי גל מסוימים מתבטלים על ידי הפרעות הרסניות, בעוד שאחרים מתחזקים על ידי הפרעות מוסיפות ומשודרים דרכם. זה גורם למסנן עם ספקטרום שידור צר וחצי רוחב שיא של 6-20 ננומטר בלבד. השידור יכול להגיע ל-60% -70%.
