הבדלים ויתרונות וחסרונות בין מיקרוסקופ פלואורסצנטי שידור ומיקרוסקופ פלואורסצנטי השתקפות
1. מיקרוסקופ פלואורסצנטי שידור: מקור אור העירור מועבר דרך חומר הדגימה דרך מעבה כדי לעורר את הקרינה. ניתן להשתמש בריכוזי שדות כהים בשימוש נפוץ, או ברכזים רגילים, כדי לכוונן את הרפלקטור כדי להמיר אור עירור ואור צד על הדגימה. זהו מיקרוסקופ פלואורסצנטי מיושן יחסית. היתרון שלו הוא הקרינה חזקה בהגדלה נמוכה, בעוד החיסרון שלו הוא שהקרינה שלו נחלשת בהגדלה הולכת וגוברת. לכן, עדיף להתבונן בחומרי דגימה גדולים יותר.
2. מיקרוסקופ פלואורסצנטי קרן נופלת: זהו סוג חדש של מיקרוסקופ פלואורסצנטי שהתפתח בעת החדשה. שלא כמו הקודם, אור העירור נופל מעדשת האובייקטיב על פני הדגימה, תוך שימוש באותה עדשת אובייקטיבית כמו מעבה התאורה ועדשת האובייקטיב לאיסוף הקרינה. יש להוסיף לנתיב האופטי מפריד אלומה בצבע כפול, היוצר זווית של 45 מעלות עם הפוטאורניום. אור העירור מוחזר לעדשת האובייקטיב ומתאסף על הדגימה. הקרינה הנוצרת על ידי המדגם ואור העירור המוחזר מפני השטח של עדשת המטרה וזכוכית הכיסוי נכנסים בו-זמנית לעדשת המטרה וחוזרים למפריד האלומות הכפול, ומפריד בין אור העירור לבין הקרינה. אור העירור השיורי נספג לאחר מכן על ידי המסנן החוסם. אם נעשה שימוש בשילובים שונים של מסנני עירור, מפרידי אלומה בצבע כפול ומסנני חסימה, הם יכולים לענות על הצרכים של תוצרי תגובה פלורסנטית שונים. היתרונות של מיקרוסקופ פלואורסצנטי זה הם תאורת שדה ראייה אחידה, הדמיה ברורה וקרינה חזקה יותר עם הגדלה גבוהה יותר.
היתרונות והחסרונות של מיקרוסקופ פלואורסצנטי שידור
מקור אור: מנורת כספית בלחץ גבוה או מנורת הלוגן.
מראה זרקור: שימוש בזרקור שדה כהה כדי להפריד בין עירור וקרינה.
עדשת אובייקטיבית: ניתן להשתמש בכל סוג של עדשת אובייקטיבית.
דגימה: דגימות דקות מתאימות יותר לתצפית בשידור.
יתרונות: ① עקב השימוש במעבה שדה כהה, אור העירור אינו יכול להיכנס לעדשת האובייקטיב, מה שמקל על יצירת רקע כהה והשגת ניגודיות טובה, וניתן להשתמש בכל עדשת אובייקטיבית לצפייה. ② בעת שימוש באובייקטיבי הגדלה נמוכה, הוא בהיר יותר ממיקרוסקופ פלואורסצנטי מחזיר אור.
חסרון: יש להתאים את מרכז וגובה הזרקור בצורה נכונה, אחרת לא ניתן לקבל תמונת פלורסנט בהירה. בשל מגבלת אורך המוקד של זרקור השדה האפל, לא ניתן להשתמש בשקופיות זכוכית עבה. אזור ההארה של שדה הראייה לא צריך להיות גדול מדי, אחרת הוא עלול לגרום לדהיית צבע הקרינה של דגימת הפלורסנט. דגימות עבות או אטומות אינן מתאימות.
היתרונות והחסרונות של מיקרוסקופ פלואורסצנטי רפלקטיבי
מקור אור: מנורת כספית בלחץ גבוה או מנורת הלוגן.
עדשת מיקוד: מכיוון שעדשת האובייקטיב משמשת כעדשת מיקוד, אין צורך בעדשת מיקוד.
עדשת אובייקטיבית: עדשת האובייקטיב המשמשת חייבת להיות מסוגלת להעביר מספיק אור אולטרה סגול ולא לייצר פלואורסצנטי בעצמה, ללא הגבלה על צמצם מספרי.
דגימה: ניתן לראות גם דגימות עבות וגם אטומות.
יתרונות: ① מכיוון שעדשת האובייקטיב משמשת גם כזרקור, היא אינה דורשת התאמה רבה. ② על ידי שימוש בשיטת ההארה של קולאר, ניתן לנצל את ההשפעות של צמצמי הצמצם ושדה הראייה. הצמצם המספרי של עדשת האובייקטיב אינו מוגבל, וניתן לקבל תמונות ברזולוציה גבוהה גם בהגדלה גבוהה ניתן גם לקבל דגימות עבות או אטומות. נצפה, וניתן להשתמש גם בגליונות כיסוי עבים ניתן לשלב גם שיטות תצפית אחרות עם הקרינה המשתקפת, במיוחד עם שיטת הפרש פאזות ושיטת הפרעות דיפרנציאליות שידור זה יכול למנוע תופעת דהיית צבע הקרינה מיותרת.
חסרון: בעת שימוש באובייקטי הגדלת הקרקע, התמונה כהה יחסית, ולכן יש להשתמש באובייקטיבי צמצם מספריים גבוהים. מערכת המסנן חייבת להפריד ביעילות בין זוהר עירור לבין הקרינה.,
