תאר בפירוט את שלבי הבחירה והשיטות של בדיקות פלורסנט למיקרוסקופיה קונפוקלית
בניסויים עם מיקרוסקופים קונפוקאליים, ניתן לזהות כמה אינדיקטורים ניסיוניים באמצעות אוטופלואורסצנטי של הדגימה עצמה או חומרים אקסוגניים, אך לרוב החומרים שייבדקו אין פלואורסצנטי מדיד וצריך לסמן אותם באמצעות בדיקות ניאון. יש לו אות ניאון מדיד. אז איך לבחור בדיקות פלורסנט למיקרוסקופיה קונפוקלית?
1. קבעו את האינדיקטורים לבדיקה בהתאם למטרת הניסוי
לאחר קביעת אינדקס הזיהוי, נקבע גם טווח הבחירה של בדיקות פלורסנט. ניתן לראות שהבחירה באיזו פרוב פלורסנט להשתמש בניסוי נקבעת לפי מטרת הניסוי. לדוגמה, אם מטרת הניסוי היא לחקור את השינויים של יוני סידן בקרדיומיוציטים כאשר מתרחש פרפור פרוזדורים, ניתן לקבוע שהחומר שייבדק הוא יוני סידן בקרדיומיוציטים, וטווח הבחירה של בדיקות פלורסנט מוגבל ל- בדיקות יוני סידן שיכולות לתייג תאים חיים. מַחַט.
2. קבע את הטווח של בדיקות פלורסנט זמינות
עבור חומרים או אינדיקטורים ניסיוניים חדשים, אם מטרת הניסוי אינה לחקור בדיקות פלורסנט חדשות, אתה יכול לבחור ליישם בדיקות בוגרות ושיטות תיוג. ניתן לקבוע את הסוג או הטווח של בדיקות פלורסנט שיכולות לסמן את החומר המיועד לבדיקה על ידי חיפוש בספרות מוסמכת או בקטלוגים של מוצרים של חברות ריאגנטים ידועות בארץ ובחו"ל.
3. בדקו האם המאפיינים של הגשושית הפלורסנטית עומדים בדרישות להכנת דגימות פלורסנט
המאפיינים של בדיקות פלורסנט משפיעות ישירות על תיוג הדגימות ועל תוצאות הניסוי. לכן, לפני בחירת בדיקות פלורסנט ותווית דגימות בניסוי, יש צורך להבין היטב את מאפייני הקרינה שלהם. המאפיינים של בדיקות פלורסנט שיש לחקור כוללים:
1. מאפייני תגובה של בדיקות אור ודגימות
2. רגישות ועוצמת הקרינה של בדיקות פלואורסצנטיות
3. תכונות ספקטרליות של דגימות המסומנות בבדיקות ניאון
4. יציבות הקרינה
5. אינטראקציה בין קרינה מרובה בדגימה
