ביומיקרוסקופיה לגבי נפח גושי הרקמות
מיקרוסקופיה ביולוגית עד כה, קיבוע קר, חתך דק קפוא וייבוש בהקפאה הם שיטות שגרתיות עבור מיקרו-חתכים בקרני רנטגן של רקמות ותאים. הפרטים של שיטה זו מוסברים כדלקמן:
עבור מיקרוסקופים ביולוגיים עם מעבה, ניתן להזיז את המעבה למעלה ולמטה כדי להפוך את הבהירות למתונה, וניתן גם לשנות את הצמצם של האור המשתנה כדי להשיג בהירות מתונה של 9b. אם האור שטוף שמש, ניתן להעלות את המעבה בצורה מתאימה, ולהגדיל את הצמצם של מקור האור המשתנה בצורה מתאימה. אם האור חזק מדי, ניתן להנמיך את עדשת המעבה כראוי, ולהקטין את הצמצם של האור המצטלב כראוי. אם אתה עדיין מרגיש מסנוור במקרה זה, אתה יכול לבחור מסנן מתאים ולהניח אותו על התושבת מתחת למעבה. אלון זה יוכל להשיג את הבהירות שמספקת אותך. כמובן, התאמת המיקום העליון והתחתון של המעבה, התאמת גודל הצמצם של הקריאה האופטית המשתנה ובחירת מסנן מתאים דורשות פרק זמן מסוים של תרגול כדי לצבור ניסיון.
נושא חשוב מאוד במיקרוסקופיה ביולוגית הוא שבתהליך הדגימה והפרדת התאים, לאחר ייבוש בהקפאה והטבעת שרף (FD), לאחר הקפאת אגרגטים דקים במיוחד, ולאחר ייבוש בהקפאה, תכולת 65 יסודות בכל חלק. יש לטפל בזהירות. התאים שיש לנתח אינם יכולים להיפגע. מכיוון שמיקרואנליזה בקרני רנטגן כוללת לא רק שלבים רבים, אלא גם עולה הרבה. אם התאים המנותחים הם תאים פגומים או תאים מתים לאחר זמן רב ועיבוד רב-שלבי, חבל מאוד להסיק מסקנות שגויות. לדוגמה, לקרדיומיוציטים המופרדים על ידי טיפול בקולגנאז יש שתי צורות, האחת היא מוט ארוך
ביומיקרוסקופיה כמות ופיזור האלקטרוליטים בשני סוגי התאים הללו שונים בתכלית. Na גבוה מאוד ו-K נמוך מאוד בקרדיומיוציטים מעגליים, וריכוז ca בנמטודות גבוה מאוד. לאחר בדיקה בשיטות ניתוח אחרות, מוכח שה-Na הגבוה וה-K הנמוך של תאים עגולים וה-Ca הגבוה במיטוכונדריה נובעים מהפגיעה בקרום התא במהלך תהליך הפרדת התאים. שיטת הקיבוע הקרה כקרח של תאים ורקמות היא בדרך כלל לאמץ תחילה כיבוי וקיבוע, ולאחר מכן לאחסן אותם בחנקן נוזלי. קיבוע מרווה חשוב מאוד להשפעת השימור. תאים חיים או רקמות טריות עשירות במים. בעת ההמרה, חלקי התאים או הרקמות שנמצאים במגע ישיר עם נוזל הקירור הכתוש (במיוחד בעת כיבוי עם חנקן נוזלי) מוקפאים ומקובעים תחילה, ובכך יוצרים "קליפה", המעכבת. החלקים המרכזיים של התאים היו. מרוסק ומקובע בקור. לכן, כאשר עושים ניתוח X-line micro-area, לעתים קרובות נמצא כי ישנם גבישי קרח במרכז תאים גדולים יותר. על מנת למנוע זאת, חומר עם נקודת התכה גבוהה מזו של חנקן נוזלי אך נמוכה מזו של 806c משמש כחומר קירור שבור. יש הרבה חומרים כאלה, אבל הכי קל להשיג, הזול ביותר הוא פרופאן מרוכז (נקודת רתיחה - 42.120c, נקודת התכה - 187.10c, משקל מולקולרי 44.1), ומהירות הקירור היא המהירה ביותר . אבל החיסרון שלו הוא שהוא דליק.
מיקרוסקופ ביולוגי יכול לשים את סיב השריר על מתלה מיוחד, כך שכאשר התכווצות סיבי השריר מגיעה לשלב מסוים וצריך לתקן אותו, הפעל מיד את הזרבובית כדי להתיז פרופאן נוזלי לסיבי השריר כדי להרוות ולתקן אותו. לאחר מכן הוצאו סיבי השריר יחד עם המסגרת והוכנסו לחנקן נוזלי. אם מקבעים תאי דם או תאים מבודדים, ראשית יש לרכז את התאים באמצעות צנטריפוגה במהירות נמוכה, להעביר את התאים לבקבוקון כסף עם מוליכות תרמית טובה, להניח את הבקבוקון בפרופאן נוזלי ולהקפיא לקיבוע. בעת קיבוע לבלב החולדות במעבדת הול, שני גושי הפלדה צוננו מראש עם הליום נוזלי (או חנקן נוזלי), ושני גושי הנחושת הוצמדו במלקחיים והונחו על החלק הקדמי והאחורי של הלבלב כדי לכבות ולקבע הלבלב. ניתן לאחסן רקמות או תאים בחנקן נוזלי לאחסון לטווח ארוך לאחר כיבוי וקיבוע.
מיקרוסקופיה ביולוגית בנוסף לשיטת החתך הקפוא האולטרה-דק המכובדת ביותר כיום, הנה עוד טכניקת שיקוע המשמשת מדענים. מוסיפים חומר ליצירת משקעים עם הרכיב שיש לנתח כדי לבטל אותו לפני הניתוח, ולאחר מכן מנתחים את המשקעים. לדוגמה, אנשים משתמשים לעתים קרובות באוקסלט ובפירואנטימונט כדי להפקיד ca בתאי שריר. הראשון אינו רגיש מספיק לריכוז הנמוך של Ca בציטופלזמה; pyroantimonate רגיש יותר ויכול ליצור משקעים צפופים באלקטרונים עם Ca חופשי במוח, אבל pyroantimonate אינו תואם לנתרן, מנגן, בריום, ברזל נוצרים גם משקעים והם פחות ספציפיים. תהליך הכנת הדגימה דומה להכנת דגימות רגילות של מיקרוסקופ אלקטרוני שידור רגיל, ההבדל הוא ש-3 אחוז אשלגן פירואנטימונאט (מלח חוצץ פוספט, pH 7.6) קבוע במשך 6 שעות לפני הקיבוע, ועל החתכים האולטרה-דקים של השריר המוכתם, משקעים שחורים נראו בקווי האמצע של פסים A ו-2 של כל סרקומר, וחתכים לא מוכתמים שימשו למיקרואנליזה בקרני רנטגן. Diaminobenzidine tetrahydrochloride (DAB) שימש כדי לזרז חומרים המכילים heme וכן הלאה. ניתן לשקול את השילוב של תגובת משקעים היסטוכימית וגשר מיקרו-בידול רנטגן במעבדות שאין להן תנאי חתך דק קפוא. ניתן לעשות חצי כמותי לפי גובה השיא של האלמנטים לניתוח
